| Congresso Brasileiro de Microbiologia 2023 | Resumo: 1029-1 | ||||
Resumo:Pseudomonas aeruginosa, uma bactéria Gram negativa oportunista, associada a altas taxas de mortalidade em infecções nosocomiais, possui diversos mecanismos de virulência e resistência a antibióticos, portanto estudos visando a bioprospecção de novos compostos com ação bactericida se tornam importantes. Punica granatum é utilizada na medicina popular por sua ação anti-inflamatória e antibacteriana, diante disso, o estudo tem como objetivo avaliar a ação bactericida do extrato etanólico da casca de frutos de P. granatum contra P. aeruginosa. A concentração mínima inibitória (CMI) do extrato foi realizada por microdiluição em caldo com diferentes concentrações do extrato. A análise da integridade da membrana bacteriana após contato com o extrato foi avaliada por citometria em tempos curtos utilizando os parâmetros de tamanho (FSC), granulosidade/complexidade (SSC) e intensidade de fluorescência (FL3) com iodeto de propídeo, um intercalante de DNA. Foi observado o efeito bactericida quando comparado com o controle (100%) em 75 mg/mL, 37,5 mg/mL e 18,7 mg/mL, com 100% ± 0,0 de inibição do crescimento bacteriano (p>0,01). Uma redução no crescimento bacteriano, nas concentrações de 9,37 mg/mL (97,93%±2,56), 4,69 mg/mL (85,11%±30,19), 2,34 mg/mL (56,64%±27,39), 1,17 mg/mL (43,78%±26,56) 0,59 mg/mL (44,35%±26,52) e 0,29 mg/mL (31,52%±18,90). A integridade das membranas da cepa PAO-1 foi avaliada por citometria de fluxo nos tempos de 5, 15, 30, 45 e 60 minutos e foram obtidas as seguintes medianas de intensidade em FL3 de PA0-1 controle e PAO-1 em contato com o extrato (1mg/mL) respectivamente: a) 5 minutos- PAO-1 (1,66±0,39)/Extrato 1mg/mL(4,66±1,28); b) 15 minutos- PAO-1 (2,54±1,22) / Extrato 1mg/mL (5,41±0,97); c) 30 minutos – PAO-1 (2,73±0,86)/ Extrato 1mg/mL (5,17±1,07); d) 45 minutos- PAO-1 (2,73±1,40)/ Extrato 1mg/mL (4,70±1,09); e) 60 minutos– PAO-1 (2,41±1,31)/ Extrato 1mg/mL (4,13±1,30). As medianas FSC: a) 5 minutos PAO-1 (12,18±3,34)/ Extrato 1mg/mL (39,99±27,57); b) 15 minutos PAO-1 (13,76±2,81)/ Extrato 1mg/mL (38,27±7,98); c) 30 minutos PAO-1 (15,39±3,13)/ Extrato 1 mg/mL (35,34±13,46); d) 45 minutos PAO-1 (18,27±7,18)/ Extrato 1mg/mL (32,98±10,44); e) 60 minutos PAO-1 (16,08±4,70)/ Extrato 1mg/mL (31,13±15,90). Medianas SSC: a) 5 minutos PAO-1 (10,83±10,11); Extrato 1mg/mL (650,5±179,6); b) 15 minutos PAO-1 (13,55±8,59)/ Extrato 1mg/mL (877,4±138,9); c) 30 minutos PAO-1 (15,27±11,45)/ Extrato 1 mg/mL (1009±158,2); d) 45 minutos PAO-1 (15,72±13,17)/ Extrato 1mg/mL (926,2±200,4); e) 60 minutos PAO-1 (10,77±6,20)/ Extrato 1mg/mL (770,5±134,3). Os dados representam média±SD de 5 experimentos onde 20.000 células foram analisadas. Análise fitoquímica do extrato hidroalcoólico de cascas de romã, demonstrou um conjunto de punicalaginas (α, β e γ), além de ácidos elágicos como substâncias majoritárias. Punica granatum apresentou atividade bactericida contra cepa PAO-1 de P.aeruginosa com alterações na estrutura da célula bacteriana, com alteração da permeabilidade de membrana em 5 minutos de contato a 1mg/mL, podendo ser uma alternativa eficaz para uso em associação com antimicrobianos no tratamento de infecções. Palavras-chave: Punica granatum, Pseudomonas aeruginosa, atividade bactericida, citometria de fluxo Agência de fomento:FAPERJ | |||||